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La synthèse peptidique se
produit souvent en couplant le groupe carboxyle de l'acide aminé reçu à
l'extrémité de la chaîne peptidique en croissance. Cette synthèse est l'inverse
de la biosynthèse protéique, au cours de laquelle l'extrémité de l'acide aminé
est liée à l'extrémité de la chaîne protéique. En raison de la nature de la
synthèse des protéines, l'ajout d'acides aminés à la chaîne peptidique se
produit de manière précise et cyclique. Et bien que les méthodes de synthèse
des peptides présentent des différences critiques, elles suivent la même
méthode par étapes pour ajouter des acides aminés à la chaîne peptidique en
croissance.
La déprotection
peptidique
Parce que les acides
aminés ont de nombreux groupes réactifs, la synthèse peptidique doit être
effectuée pour éviter les réactions secondaires qui peuvent diminuer la
longueur et provoquer la ramification de la chaîne peptidique. Pour permettre
la formation de peptides avec des réactions minimales, des groupes chimiques
ont été établis qui se lient aux groupes d'acides aminés et bloquent et
protègent le groupe fonctionnel des réactions génériques.
L'immunisation avec des
antigènes peptidiques échoue souvent, car les peptides sont trop petits pour
générer par eux-mêmes des réponses immunitaires significatives. Pour résoudre
ce problème, les peptides doivent être conjugués à des protéines porteuses plus
grandes, telles que l'hémocyanine de patelle, l'albumine sérique bovine ou
l'ovalbumine. Pour assurer la génération efficace et réussie d'anticorps
anti-peptide, l'utilisation de peptides
à façon dans des conjugués protéiques est toujours recommandée.
Le couplage de la
protéine Peptide Carrier se fait comme suit
Choisir la protéine
porteuse
Les chercheurs peuvent
sélectionner une protéine parmi une gamme d'options, dont les protéines
porteuses couramment utilisées sont les suivantes :
Keyhole Limpet Hemocyanin
est la protéine porteuse la plus couramment utilisée, probablement parce
qu'elle a une immunogénicité significativement élevée par rapport à d'autres
protéines. Les peptides KLH ont une solubilité limitée dans l'eau, ce qui donne
un aspect trouble. La turbidité n'affecte pas son immunogénicité et la solution
résultante peut être utilisée pour des immunisations efficaces.
L'albumine sérique bovine est l'une des
albumines les plus stables et les plus solubles disponibles. Il contient des
lysines, qui sont accessibles pour la conjugaison. Par conséquent, c'est une
protéine porteuse populaire pour les composés antigéniques.
L'ovalbumine est une protéine éloignée des
œufs de poule. Il est fréquemment utilisé comme protéine porteuse de contrôle
pour confirmer que les anticorps sont précis pour le peptide cible plutôt que
pour la protéine porteuse elle-même.
Conception et synthèse de
peptides
Nous synthétisons vos
peptides avec des poignées chimiques appropriées à la bonne position, de sorte
que le peptide soit exposé à la surface du support protéique. Nous pouvons
également introduire une entretoise rigide pour régler de manière optimale la
distance à la surface porteuse.
Chimie de liaison
Nous appliquons
différentes chimies de liaison pour la conjugaison des peptides. Le lieur
classique se fixe à la protéine par la formation d'une liaison amide à
n'importe quel groupe amine, tandis que le peptide se connecte au lieur par
l'addition conjuguée d'un thiol à une fonctionnalité maléimide. Cela fournit
des liaisons peptide-protéine stables qui ne peuvent pas être détruites dans
des conditions de laboratoire.